药物入医保大大提高了治疗的可及性，极大减轻患儿家庭的经济负担的同时，也使得关键措施的早期筛查有了极大发展。今天就来聊聊SMA。

01  什么是SMA

脊髓性肌肉萎缩症(Spinal Muscular Atrophy, SMA)是一组以缓慢进行性加重、肢体近端对称性肌无力、肌萎缩为主要临床表现的常染色体隐性遗传病。类似渐冻症却比渐冻症更为严重，是2岁以下婴幼儿的“头号遗传病杀手”。

SMA是常染色体隐性遗传病，携带率为1/50~1/60，发病率为1/6000~1/10000活产胎儿。如果父母均是携带者，而新生儿患病的概率为1/4。

02 SMA致病机制

SMA与SMN运动神经元存活基因（Survial of motor neurons gene）相关，定位于5q13.2。

SMN有2个高度同源拷贝SMN1（OMIM 600354）和SMN2（OMIM 601627），两者仅有5个碱基差别，其中2个碱基位于外显子7、8，另3个碱基在内含子6、7中。

SMN1基因7号外显子纯合缺失是SMA的主要致病原因。在健康人中，该基因会产生运动神经元存活蛋白或SMN蛋白，对控制肌肉的神经功能至关重要。如果SMN1外显子7缺失，则无法合成SMN蛋白，导致神经细胞就无法正常运作并最终死亡，导致肌肉无力，进而影响人的日常生活甚至生命。

SMN2基因拷贝数增加有利于SMA症状减轻。每个人SMN2拷贝数可能是0、1、2、3、或者4个。一个病人拥有的SMN2基因拷贝数量越多，则他发病的时间越晚、病情越轻。

SMA携带者的SMN1基因型主要分为4种，患病基因型有3种。

备注：将携带1个SMN1基因拷贝定义为1拷贝（1‐copy）；将携带2个SMN1基因拷贝定义为2拷贝（2‐copy）。在致病等位基因中，将携带SMN1 缺失或因转换导致的SMN1缺失定义为0拷贝（0‐copy）；将携带微小变异的SMN1基因定义为1^d。

03  SMA相关基因诊断技术

目前临床主要的拷贝数检测技术有MLPA和qPCR技术：

多重连接探针扩增（MLPA）：

MLPA方法针对SMN1与SMN2基因第7和第8外显子碱基差异位点设计杂交探针，采用其他染色体位点的多个管家基因作为内参基因，以SMN1∶SMN2不同拷贝数的样本作为平行对照，在完成杂交连接等系列反应后，根据荧光峰面积的比值比来判断目标基因序列的拷贝数。

MLPA技术通过直接检测SMN1拷贝数，明确区分患者、携带者及正常人；还可同时检测患者的SMN2拷贝数，是目前国内外SMA管理共识推荐使用诊断SMA的金标准。但是该方法不能检测SMN1基因微小变异与SMN1［2+0］基因型。

荧光定量PCR：

主要原理是通过多重实时荧光定量PCR 反应，以管家基因序列为内参，采用Taqman探针法分别对SMN1基因第7和第8外显子进行拷贝数相对定量，来判断是否发生缺失变异。

该方法优势是操作简便、成本低廉，适用于人群筛查，但其特异性相比MLPA方法略逊，且SMN2拷贝数需要另外设计探针进行检测。同样不能检测SMN1基因微小变异和［2+0］基因型。

此外巢式PCR，PCR-RFLP，DHPLC，Sanger测序，数字PCR，NGS等技术也都在SMA检测中有应用，每种方法都有自己的优劣势。

04  SMA检测市场容量

SMA主要检测主要针对人群为婚检、孕检以及新生儿等人群。现在每年大概1000万新生儿，每个SMA检测数百元不等（如深圳351元，青岛600元），粗略算下至少也是一个几十亿的市场容量。

05  SMA检测产品

从NMPA官网搜索，SMA检测共有3个产品取得注册证。

1）上海五色石

五色石的运动神经元存活基因1（SMN1）外显子缺失检测试剂盒 （荧光定量PCR法）是在中国最早获批的SMA检测产品，采用MGB探针实时多重荧光定量PCR的方法，使用人RPP40基因作为内标基因，分别对SMN1基因第7外显子和第8外显子（目的基因）进行扩增并对拷贝数进行相对定量检测，同时采用化学阻断的方法控制运动神经元存活基因2对检测结果的影响。

产品特点：

• 创新—国内首创，全球首次合法化认证

• 快速—近2小时可完成实验，自动判读、结果精准

• 经济—通用技术平台、样本通量大、检测成本低

• 安全—全程闭管操作、避免污染、人体无害

• 荣誉—2015年被CFDA评为“国内首创具有显著临床应用价值的创新医疗器械产品”

• 荣誉—首届“创之星”杯中国体外诊断最佳创新产品（试剂），获得 “一等奖”

• 荣誉—入选科技部《创新医疗器械产品目录（2018）》

2） 天隆科技

人运动神经元存活基因 1(SMN1) 检测试剂盒（PCR-熔解曲线法）

该产品通过设计特异性ARMS-PCR引物，并采用熔解曲线法分析，可以准确地定量检测SMN1基因第7、第8号外显子拷贝数，实现SMA患者的辅助诊断和携带者筛查。

方案优势：

• 权威认证：获得中国NMPA认证、欧盟CE认证。

• 结果精准：引物特异，结合熔解曲线分析，纯合及杂合缺失皆可检测。

• 操作便捷：采用自动化核酸提取，并基于荧光PCR平台，操作简便，结果自动判读。

• 经济高效：相比PCR-RFLP及MLPA等方法，检测成本更低；2小时左右即可完成96个样本检测。

• 安全可控：血样全程闭管检测，避免样本污染检测靶标定性检测人基因组 DNA 中第 7 外显子和（或）第 8 外显子

3）深圳会众

人运动神经元存活基因1（SMN1）检测试剂盒（PCR-荧光探针法）

该产品通过对SMA致病基因SMN1外显子7的拷贝数检测，可明确检测患者、携带者、正常人的三种不同基因型。

产品优势：

• 检测快速：1小时出结果

• 防污染：UNG酶防污染体系，防止气溶胶污染

• 结果易判读：RQ值直接判读结果

• 高通量：一次可检测1-384个样本

• 高灵敏度：检测下限为2ng/μl

• 简化配液：2种组份，试剂配制简单

4) 贝瑞基因

今年6月份贝瑞基因公告称获得用于检测SMA（脊髓性肌萎缩症）中多种突变的引物组、试剂盒、方法和系统，主要包括构建三代测序文库、基于三代测序检测SMA疾病相关基因突变等。据了解，这项发明专利是国际上首创的针对SMA的三代测序解决方案。

06  写在最后